Возбудитель сибирской язвы под микроскопом. Бациллы сибирской язвы и сибирская язва (злокачественный карбункул). Бактериологическое и биологическое исследование

Сибирская язва известна с глубокой древности. Возбудитель ее — В. anthracis — впервые был описан Поллендером (1849) и Давеном (1850). Большой вклад в изучение сибирской язвы внесли Кох (1876), Пастер (1881) и Л. С. Ценковский (1883).

Морфология и биологические свойства. Возбудитель сибирской язвы (В. anthracis) представляет собой крупную палочку с обрубленными концами (в среднем 1,5X8 мкм). В окрашенном препарате палочки располагаются одиночно, попарно или цепочкой (рис. 38, 1).

Грамположительны. Микроб неподвижен, окружен прозрачной капсулой, образование которой характерно для вирулентных штаммов. Капсула образуется как в организме больных людей и животных, так и при культивировании на специальных питательных средах. В неблагоприятных условиях внешней среды при доступе кислорода и температуре от 15 до 42°С микроб образует спору, которая располагается центрально и имеет овальную форму. Диаметр ее не превышает поперечника клетки. При попадании в благоприятную среду споры прорастают в течение нескольких часов.

Возбудитель сибирской язвы относится к факультативным аэробам. Оптимальная температура роста 35— 37°С и рН 7,4—8,0. Микроб нетребователен к питательным средам, поэтому может расти даже на таких субстратах, как настой соломы, сырой и вареный картофель, экстракты злаков, гороха и др. На мясо-пептонном агаре рост настолько характерен, что имеет диагностическое значение. Через 24 ч роста появляются колонии: серебристо-серые, зернистые, диаметром 3—5 мм, с бахромчатыми краями и отходящими от них пучками нитей, напоминающими голову медузы или львиную гриву. Такой рост (R-форма) характерен для вирулентных штаммов.

В старых культурах появляются гладкие S-формы колоний, авирулентные. В бульоне через 18—24 ч образуется осадок в виде хлопьев, а сам бульон остается прозрачным.

Биохимическая активность невелика: разлагает глюкозу, мальтозу, сахарозу с образованием кислоты, молоко медленно свертывает и пептонизирует. Характерен рост в столбике желатина: в виде «опрокинутой елочки», позже желатин воронкоооразно разжижается; на кровяном агape не дает гемолиза, чем отличается от сходных с ним почвенных и ложносибиреязвенных бацилл. Патогенетическими факторами возбудителя сибирской язвы являются его способность продуцировать экзотоксин и образовывать капсулу. С экзотоксином связывают воспалительное и летальное действие возбудителя. Обнаружено, что токсин также подавляет фагоцитарную активность лейкоцитов. Капсула препятствует фагоцитозу бацилл, способствуя проявлению действия основного патогенетического фактора — токсина. Токсин вызывает в организме повышение проницаемости сосудов, расстройство дыхания вследствие поражения центральной нервной системы, изменяет клеточный и химический состав крови.

Устойчивость. Вегетативные формы малоустойчивы: в трупе погибают в течение 1—3 сут, при 60°С — через 15 мин, а при 75°С — через минуту. Споры сибиреязвенных бацилл отличаются большой устойчивостью. Они сохраняются во внешней среде длительнее, чем все другие известные патогенные спорообразующие микробы. Выдерживают сухой жар 120—140°С в течение 2—3 ч, автоклавирование при 120°С — 5—10 мин. Дезинфицирующие растворы (сулема 1: 1000, 5% раствор карболовой кислоты, 5—10% раствор хлорамина) убивают их только за несколько часов, а этиловый спирт в концентрациях от 25% до абсолютного — за 50 дней.

Антигенная структура. Возбудитель сибирской язвы содержит в клеточной стенке полисахаридный антиген и капсульный протеиновый антиген. К обоим антигенам в организме вырабатываются антитела, но защитными свойствами они не обладают. В организме животных и человека микроб образует особый протективный антиген, который обусловливает состояние иммунитета.

Патогенность . Сибирской язвой болеют преимущественно домашние травоядные животные. Заражение животных происходит главным образом через инфицированный корм, что приводит к развитию кишечной формы сибирской язвы и сопровождается выделением большого количества микробов с испражнениями. В лабораторных условиях наиболее чувствительны к сибирской язве морские свинки, белые мыши и кролики. При подкожном введении даже небольших доз микроба животные погибают через 2—4 дня. На вскрытии сибиреязвенные бациллы обнаруживаются в крови и различных органах.

Патогенез и клиника. Инкубационный период при сибирской язве длится 2—3 дня. Различают несколько клинических форм заболевания в зависимости от способа заражения: кожную, легочную и кишечную. Наиболее часто (в 98% случаев) встречается кожная форма болезни. На месте внедрения бацилл сибирской язвы появляется красное пятнышко, которое затем превращается в папулу, пустулу и при усилении воспалительного процесса — в сибиреязвенный карбункул. Чаще всего он располагается на лице, руках и других открытых частях тела.

Общее состояние больного тяжелое: температура 0°С сильная головная боль, увеличение регионарных лимфатических узлов. Обычно кожная форма при своевременном лечении заканчивается выздоровлением. Однако при неблагоприятном течении возбудитель может попасть в кровь, что приводит к развитию сепсиса и заканчивается, как правило, летально. Легочная форма возникает только у человека и характеризуется высокой температурой, развитием бронхопневмонии, тяжелой одышкой и другими симптомами. При кишечной форме наблюдаются боли в животе, вздутие, диспепсические явления. При легочной и кишечной формах прогноз неблагоприятный — заболевание заканчивается смертью больного. В очень редких случаях при массивном заражении вирулентными штаммами сибиреязвенных бацилл развивается (первично) септическая форма, приводящая к летальному исходу.

Иммунитет. При сибирской язве нестойкий, возможны повторные заболевания. Основная роль в защите организма принадлежит фагоцитарной реакции, обусловленной образованием протективного антигена.

Микробиологическая диагностика. В лабораторию направляют патологический материал, взятый у больного: отделяемое карбункула, мокроту, испражнения, кровь, материал от животных (шерсть, кожа, мясо, трупный материал и др.), воду, почву, смывы с различных объектов внешней среды. Лабораторная диагностика сибирской язвы складывается из микробиологического исследования, биопробы, кожно-аллергической пробы, реакции термопреципитации по Асколи.

При микробиологическом исследовании готовят мазок из патологического материала, окрашивают по Граму, микроскопируют. Затем материал засевают на мясо-пептонный агар и мясо-пептонный бульон и выращивают сутки в термостате при 37°С. Выделенную культуру идентифицируют по морфологическим и культуральным свойствам. Для выделения чистой культуры сибиреязвенных бацилл, исследуемый материал можно вводить подкожно морским свинкам или белым мышам (биопроба). Животные погибают обычно через 1—2 дня. Характерная патологоанатомическая картина при вскрытии и микроскопия мазков из различных органов (наличие капсульных сибиреязвенных бацилл) помогают поставить диагноз.

Применяют также кожно-аллергическую пробу, положительную уже с первых дней заболевания. Метод основан на способности организма больного отвечать местной аллергической реакцией на введение сибиреязвенного аллергена (антраксин).

С целью обнаружения сибиреязвенного антигена в различных объектах (кожевенное, меховое сырье и др.) используют реакцию термопреципитации Деколи с преципитирующей противосибиреязвенной сывороткой. Реакция эта высокочувствительна, отрицательный результат исключает наличие сибирской язвы.

Профилактика и лечение. Поскольку источником инфекции являются животные, основные профилактические мероприятия проводит ветеринарная служба. Специфическая профилактика — введение живой сибиреязвенной вакцины СТИ, полученной из бескапсульного штамма бацилл сибирской язвы. Вакцинацию проводят по эпидемиологическим показаниям лицам, связанным с животноводством. Иммунитет после прививки сохраняется до года.

Для лечения используют антибиотики, специфическую противосибиреязвенную сыворотку и глобулин.

Оглавление темы "Возбудитель сибирской язвы. Клинические проявления заражения сибирской язвой. Bacillus cereus.":

Культуральные свойства bacillus anthracis. Культуральные свойства сибирской язвы. Спорообразование сибирской язвой. Биохимические свойства сибирской язвы.

Вacillus anthracis хорошо растёт на обычных питательных средах. Температурный оптимум 35-37 °С; оптимум рН 7,0. В жидких средах растёт в виде ватных хлопьев, не вызывая помутнения среды. При посеве уколом в желатину даёт характерный рост в виде «перевёрнутой ёлочки» (рис. 13-4). Позднее верхний слой желатины разжижается, образуя воронку.

На твёрдых средах сибирская язва образует шероховатые, неровные, серовато-белые, волокнистые R-колонии диаметром 2-3 мм. При малом увеличении колонии напоминают «голову Медузы» или «львиную гриву» (рис. 13-5); характерный вид колониям придают переплетающиеся цепочки бактерий сибирской язвы .

Спорообразование сибирской язвой

В аэробных условиях при 12 °С и 40 °С палочка сибирской язвы образует центрально расположенные споры, размером 0,8-1,0x1,5 мкм (см. рис. 4-13). В живом организме спорообразования не происходит; также оно отсутствует в невскрытых трупах, что опосредовано поглощением свободного кислорода в процессе гниения. Споры отличает высокая устойчивость к внешним воздействиям: сухой жар убивает бактерии при 140 °С за 2-3 ч, автоклави-рование при 121 °С - за 15-20 мин. В воде они сохраняются до 10 лет, в почве - до 30 лет. Скорость прорастания зависит от температуры (оптимум 37 °С) и возраста спор; молодые споры в оптимальных условиях прорастают за 1-1,5 ч, старые - за 2-10 ч.

Биохимические свойства сибирской язвы

Сибирская язва образует кислоту без газа на средах с глюкозой, фруктозой, мальтозой и декстрином. Гидролизует крахмал; образует ацетоин и лецитиназу. В отличие от сапрофитов, палочки сибирской язвы лишены фосфатазы и не разлагают фосфаты, содержащиеся в питательной среде. Молоко свёртывают за 3-5 сут. Сгусток медленно пептонизируется и разжижается с выделением аммиака, а также (в связи с окислением тирозина) окрашивается в бурый цвет.

Патогенные микроорганизмы представляют опасность для здоровья человека. Против многих микробов иммунная защита оказывается малоэффективной. Среди наиболее опасных агентов выделяется возбудитель сибирской язвы – бактерии вызывают тяжелые осложнения, могут привести к летальному исходу. Бациллы отличаются высокой патогенностью и вирулентностью, хорошо приспосабливаются к окружающей среде и способны годами сохранять активность.

Латинское название возбудителя сибирской язвы – Bacillus anthracis. Морфология антракса – палочковидная грамположительная неподвижная клетка, способная образовывать капсулы. Сибирская язва считается особо опасным инфекционным заболеванием. Основной источник инфицирования человека – зараженный рогатый скот.

Возбудителем сибирской язвы является Bacillus anthracis. Злокачественный карбункул, иначе называемый бацилла антракса, был впервые упомянут в древних источниках. В библейских текстах заболевание называлось «священный огонь» – язва с угольно-черным основанием, окруженная воспаленной тканью. Изучение палочки сибирской язвы было длительным. Практически одновременно несколько ученых внесли значительный вклад в описание и выявление патогенного микроорганизма:

В середине XVIII века (1766 год) впервые описана клиническая картина течения сибиреязвенной болезни.
На фоне эпидемии среди коров Андреевский С.С. показал роль бактерий Bacillus anthracis, заразив себя бациллой от рогатого скота – Сибирь, 1788 год.
В 1849 году бациллу сибирской язвы открыл А.Поллендер (Германия), в 1850 году бактерию выявил К.Давен (Франция), в 1854 году – Брауэль Ф.А. (Германия, Россия).
Известный немецкий ученый Роберт Кох в 1877 году вырастил чистую сибиреязвенную бактерию, а в 1881 году Луи Пастер приготовил первую вакцину.
Большой вклад в изучение микроорганизма внесли ученые Моран, Четыркин Р.С., Ценковский Л.С., Вальтер Хессе.

Поиски причины, вызвавшей болезнь, привели к одновременному открытию и выявлению бациллы несколькими учеными. Но считается, что именно Роббер Кох выделил бактерию Bacillus anthracis, вырастив чистую культуру. Название «сибирская язва» связывают со вспышками эпидемии в Сибири, когда Андреевский С.С. доказал путь передачи инфекционного агента от скота к человеку во время большой эпизоотии среди коров. Территориально инфекционное заболевание распространено в Южной Америке, Азии, Африке. Зарегистрированы вспышки в РФ.

Полная хронология исследования Bacillus anthracis

Таксономическая принадлежность

Что такое Bacillus anthracis с точки зрения микробиологии:

грамположительная бактерия;
спорообразующая;
пребывает в неподвижном состоянии;
вызывает обширную интоксикацию, бактериальную инфекцию.

Возбудитель сибирской язвы относится к роду бацилл отдела Firmicutes (фирмикуты), принадлежит к факультативным анаэробам. Отличие от вируса: не погибает вне живых клеток, сохраняет активность, в неблагоприятных условиях образует бактериальную спору. Параметры таксономии и характеристики возбудителя сибирской язвы по микробиологии:

Класс Shizomycetes (шизомицеты) – истинные дробящиеся грибы.
Порядок Eeubacteriales, в микробиологии семейство Bacillaceae.
По типичным признакам выделен вид Bacillus anthracis, род Bacillus.

Систематика и классификация сибиреязвенного возбудителя строится на сочетании морфологических свойств, культуральных признаков, физических характеристик. Бацилла представляет собой крупную палочку, 1-1,2х3-5 мкн, но увидеть ее можно только под микроскопом. Расположение может быть парным, одиночным, цепочкой. Бациллы образуют белковые капсулы в живых клетках, растут на простых (универсальных) питательных средах. По культуральным признакам факультативный анаэроб, хемоорганогетеротроф. Энергетические циклы происходят без участия кислорода, в воздушной среде клетки не погибают. Источник питания – органические вещества.

Роберт Кох внес существенный вклад в изучение бациллы

Строение микроба

Микроорганизм Bacillus anthracis, к которому особенно восприимчивы травоядные животные, относится к возбудителям-зооантропонозам. Вызываемая патогенами инфекция общая для животных и людей, причем животное может и не выступать посредником при передаче агента.

По форме микроорганизмы представляют собой продолговатые микробы, имеющие характерные закругленные края. Палочки располагаются одиночно, короткими или длинными цепочками, парами с внешне отсеченными окончаниями. В пораженных клетках хозяина образуют капсулы для защиты. Отличаются от других микробов семейства полной неподвижностью, что служит основным идентифицирующим признаком диагностики. Морфология возбудителя сибирской язвы имеет характерные свойства бактерии:

Плотные слои – крупные колонии, жидкие среды – цепочки.
Хорошая окраска анилиновыми красителями.
По форме возбудители сибирской язвы палочки.
Не имеют жгутиков, могут образовывать споры.
Условия спорообразования – кислород, влажность.
Центральное расположение спор, большой диаметр.
Капсулообразование – защита внутри живых клеток.

Морфологические свойства четко определены: спорообразование начинается при температуре 30-35°C вне организма хозяина, капсулообразование – на кровяных и сывороточных основах, в живых клетках человека и животных. В крови, органах, тканях зараженных особей и трупах обнаруживается одиночное или парное расположение, короткие цепочки микроорганизмов из трех-четырех клеток. Колонии бактерий на плотных (твердых) средах культивирования (столбики агара) хорошо выраженные, нитевидные, гривообразные.

В микробиологии сибиреязвенные палочки определяют как бактерии с высокой вирулентностью колоний R-формы (неровные края, шероховатость) и потерей бациллами вирулентности при переходе в S-форму (круглые гладкие колонии). R-S-диссоциация бактерий характеризует приобретение клетками выраженных селективных преимуществ: устойчивость к фагоцитозу макрофагами, адаптивность к факторам окружающей среды, вирулентность к бактерицидному действию.

Корова, зараженная сибиреязвенной бациллой

Жизненный цикл

Во внешней среде, то есть вне клеток живого организма, бактерии сибирской язвы находятся в виде спор. Основным очагом инфекции является почва, в которой живут бациллы. Различают первичные (прямое заражение) и вторичные (заражение новых территорий) инфекционные очаги. Пылевым путем бактерии попадают на шерсть травоядных животных, могут проникнуть в кишечник и дыхательные пути.

С этого момента начинается выработка экзотоксина. Болезнь стремительно разрушает иммунную защиту организма животных, моментально размножается и приводит к смерти носителя. Владельцы животных отмечают резкий падеж домашнего и фермерского скота. Трупы погибших животных разлагаются. Если их не сжигать, возбудители сибирской язвы снова попадают в почву и образуют споры, которые живут столетиями за счет органического почвенного состава.

Пути заражения человека включают не только передачу зоонозов от животных к людям. Потенциальную угрозу представляют пастбища, выгоны, скотобойни, скотомогильники и окружающая их территория, водоемы, растения. Содержать бактерии может дорожная пыль в местах выпаса, насекомые способны переносить инфекцию, в кишечник бациллы могут попасть с мясной и молочной продукцией.

Потеря клеткой капсулы уничтожает вирулентность микроба – способность заражать организм. Вирулентность не является идентичной патогенности, поскольку вызывать заболевание может определенное количество бактериальных клеток, а это в большой степени зависит от восприимчивости хозяина. Для отдельных заболеваний низкая вирулентность является признаком бессимптомного носительства и отсутствия отрицательных последствий.

Крупный рогатый скот является переносчиком Bacillus anthracis

Биохимические свойства

Bacillus anthracis образуют ферменты, определяющие биохимические свойства микроба. Ферментативные реакции клеток:

участвуют в образовании глюкозы, декстрина, сахарозы, других веществ;
слабое кислотообразование на основах с введением салицина, глицерина;
отсутствие сбраживания раффинозы, сорбита, инулина, арабинозы, галактозы;
выделение аммиака, утилизация цитратов, образование ацетилметилкарбинола;
редуцирование метиленового синего, восстановление нитратов в нитриты;
отдельные чистые культуры микробов (штаммы) образуют сероводород.

Ферментативная активность клеток хорошо выраженная, протеолитические свойства состоят в разжижении желатина, гидролизе крахмала, медленном свертывании молока.

Устойчивость

Невскрытый труп животного. Продукты гниения убивают клетки Bacillus anthracis за несколько дней. Зато возбудители более 60 лет активны в запаянных бульонах.
Замороженное мясо. Жизнеспособность сохраняется две недели, засоленный мясной продукт – до полутора месяцев.
Навозная жижа с сибиреязвенной кровью. Клетки погибают через пару часов, споры остаются вирулентными месяцами.
Почвенная среда. Лучшие условия для бацилл, жизнеспособность сохраняется 50 лет и более.

Резистентность (устойчивость) возбудителя сибирской язвы довольно высока. Хорошей сопротивляемостью к негативным воздействиям обладают споровые клетки. Захоронение скота – прямая угроза заражению других животных и людей. На 2016 год в Московской области по официальным данным учтено 19 мест погребения трупов скота, но есть захоронения, не обозначенные на картах местности. На скотомогильниках бактерии Bacillus anthracis находятся в состоянии спор и сохраняют жизнеспособность десятилетиями, а по мнению некоторых ученых, столетиями.

В северных районах вспышка сибиреязвенной болезни унесла жизни тысячи животных

Способы уничтожения бактерий средствами дезинфекции позволяют эффективно бороться с возбудителем заболевания:

На вегетативные клетки достаточно воздействовать растворами спирта, эфира, фенола, перекиси водорода, хлорной извести, формалина, хлорамина – 5 минут.
Уничтожить бактерии в вегетативном состоянии за несколько часов помогает ультрафиолетовое излучение, нагревание до 50-55°C (час), кипячение (секунды).
Споровые бациллы убить сложнее. Растворами спиртов, эфиров воздействуют на бациллы 50 дней, формалином – 15 минут, фенолом, хлорамином – часами.
Справиться со споровыми клетками помогает воздействие сухим жаром (120-140°C) до 2-3 часов, автоклавированием от 110°C, текущим паром 10 минут.

Низкая температура окружающей среды -10…-12°C практически не влияет на жизнеспособность бактерий, они остаются активными от 12 до 24 дней. Bacillus anthracis высокочувствителен к левомицетину, лизоциму, пенициллину, хлортетрациклину. На этом свойстве строится выбор антибактериальных препаратов при сибиреязвенной болезни.

Патогенность

Болезнетворные бактерии выделяются в почву, пыль и внешнюю среду с испражнениями, слизистыми и кровавыми выделениями животных. К заболеванию восприимчивы травоядные. Возбудитель сибирской язвы поражает овец, коров, буйволов, свиней, оленей, лошадей, ослов, мулов, коз, верблюдов. Зарегистрированы случаи заражения диких зверей, инфицирование птиц. Из лабораторных животных к патогену чувствительны кролики, мыши, морские свинки.

Основными факторами патогенности при всплесках сибирской язвы выступают резистентность, вирулентность, короткий инкубационный период, несколько путей передачи заболевания, смертельная опасность заражения, эпидемиологическая составляющая. Случаи заболевания периодически регистрируют в регионах России.

Заразность

Бацилла антракса считается высокозаразной. Тяжесть протекания заболевания зависит от количества болезнетворных бактерий, попавших в организм. Имеет значение патогенез болезни, а также путь проникновения микроорганизмов. Сибирская язва у животных развивается стремительно и поголовно за счет получения больших доз инфекционных бацилл вместе с кормом, содержащим споры, от испражнений травоядного мелкого, крупного скота.

Переносчиком Bacillus anthracis могут стать насекомые (слепни, оводы, мухи), заражающие животных через укус. Симптомы проявляются мгновенно, сопровождаются лихорадкой, судорогами, нарушением работы сердца, мозга, кишечника. Испытывая мучительные страдания, через неделю животное погибает.

Опасения вызывают факторы патогенности возбудителя – высокая вирулентность и заразность болезни. Если человек вдохнет большую дозу бацилл, смертность наступает даже при лечении в стационаре. Способы проникновения бактерий в организм человека:

контактный;
алиментарный;
воздушно-пылевой;
трансмиссивный.

Наиболее распространенные посредники заражения человека сибирской язвой – домашние и фермерские травоядные животные (коровы, овцы, свиньи). Получить дозу инфекционных агентов можно через мясную, молочную продукцию.

Женщина с сибиреязвенными поражениями кожи

Токсины

Антигенная структура палочек сибиреязвенной болезни включает полисахаридный и протеиновый антигены. Соматический антиген расположен в стенке микробной клетки, обладает высокой термоустойчивостью, против него антитела не продуцируются. Капсульный антиген структуры обеспечивает антифагоцитарное действие клеток.

Одним из важнейших факторов патогенности возбудителя язвы является наличие капсульного антигена. Проникая в живой организм хозяина, бактерия «окутывается» капсульной оболочкой, которая защищает ее от различных негативных воздействий, включая действие фагоцитарных клеток. Следующим важным параметром высокой патогенности сибиреязвенной палочки выступает сложный комплекс токсина:

Эдематозный фактор отечности, связанный с геном суа, продуктом которого служит аденилатциклаза, вызывает отек тканей.
Ген pag, протективный антиген, взаимодействует с мембранами клеток, индуцирует (способствует проявлению) синтез защитных антител.
Летальный фактор, связанный с геном lef, приводит к смертельному исходу заболевания.

Факторы токсичности патогенной клетки действуют синергидно – совместно эффективно. В синтезе капсул сибиреязвенной палочки принимают участие плазмиды. Первый фактор трехкомпонентного экзотоксина имеет белково-углеродную структуру, второй и третий – чисто белковую природу.

Выращивание

Немецкому ученому Роберту Коху удалось вывести чистую культуру благодаря многочисленным экспериментам и случаю. Первоначально для культивирования возбудителя сибирской язвы Кох использовал жидкий бульон: сыворотку бычьей крови, пасту крахмала, яичный белок, желатин с бульоном. Но это не гарантировало чистоту полученных результатов. Микробиолог и сотрудник лаборатории Коха Вальтер Хессе предложил использовать в экспериментах агар-агар (полисахаридная смесь агарозы и агаропектина из водорослей). Агар-агар стал идеальной желеобразной основой питательных сред.

Рост и культивирование палочки имеют такие особенности:

Сибиреязвенные бактерии на жидких питательных средах растут в виде рыхлой осадочной колонии. Наблюдается распад осадка на белые хлопья R-формы при встряхивании посева на МПБ (мясо-пептонный бульон).
Проявление культуральных свойств возбудителя сибирской язвы на плотной поверхности МПА (мясо-пептонный агар): температура +37°C, бактерии формируют шероховатые снежинки R-формы, свойственные вирулентным штаммам.
Культивирование на сывороточном агаре с вовлечением углекислоты позволяет выращивать S или M-формы с образованием капсульных палочек. В первом случае гладкие полупрозрачные, во втором – капсульные, мукоидные, слизистые.
Посев бактерий на желатиновые столбики дает результат на 5-е сутки и ранее – колония в виде бело-желтого стержня-елочки. Верхний желатиновый слой разжижается в результате многостадийной ферментативной реакции.

Выращивание чистой культуры возбудителя выполняется на универсальных питательных средах МПА, МПБ, картофеле, сыворотке, злаковых, бобовых экстрактах, молоке. С пенициллиновыми средами бактерии через 3 часа образуют колонии цепочек в форме жемчужных ожерелий – сферопластов.

Дезактивация сибиреязвенной вспышки

Диагностика возбудителя

Для выявления Bacillus anthracis применяют бактериологический и биологический методы исследования. Важным признаком заболевания выступает обнаружение типичных морфологических свойств палочек. Лабораторная диагностика сибирской язвы выполняется на разных патогенных материалах:

При кожной форме сибиреязвенной болезни (поражение кожных покровов) берут отделяемые вещества карбункула, содержимое околоязвенных пузырьков.
Для постановки достоверного диагноза при кишечной форме заболевания исследуют мочу, испражнения пациентов.
Если есть подозрение на легочную форму инфицирования, для постановки диагноза берут пробы мокроты для исследований в пульмонологии.
Для определения септической формы сибиреязвенной болезни проводится дифференциальный анализ крови.

Дополнительно для лабораторной диагностики и обнаружения возбудителя сибирской язвы делают забор проб продуктов питания, смывов с объектов внешней среды, патогенного материала животных. Чтобы достоверно дифференцировать Bacillus anthracis от других микроорганизмов, выделяют культуру возбудителя из образцов. Проведение бактериоскопического исследования одновременно с биологической пробой:

Посев патогенных образцов на питательные среды и кровяной агар.
Инкубация культуры при +37°C не менее 18 часов.
Подкожное заражение живых лабораторных животных.
Идентификация форм колоний по типичным признакам.
Забор материала у погибших лабораторных животных.
Повторная биологическая проба с введением чистого штамма.

Окончательные результаты исследований в микробиологии и бактериоскопии оценивают по диагностическим признакам сибирской язвы: капсулообразование, специфическая патогенность, неподвижность, лецитиназная активность, отсутствие гемолиза.

Когда выявить возбудитель невозможно методами бактериоскопии и биопробы, применяют реакцию Асколи. Высокочувствительный метод термокильцепреципитации позволяет обнаружить незначительное количество палочек. Токсигенность возбудителя сибирской язвы выявляют с помощью реакции, определяющей соматический антиген бацилл. Основа метода – получение экстракта термостойкого антигена токсина холодным способом или кипячением с фильтрацией субстанции.

Исследования проводятся в узкой пробирке. Преципитирующие сыворотку компоненты при инфицировании Bacillus anthracis включают в себя выявление реакции по нескольким ступеням контроля. Медленное наслаивание термоэкстракта на преципитирующие сыворотки способствует образованию тонкого слоя преципитата на границе двух жидкостей. Образование осадка – признак неспецифической реакции.

Реже при лабораторном исследовании используют метод серологической диагностики. Патологическим материалом служит мех, кожа, свежие пробы, загнившие образцы. Аллергический тест используют для проверки больных, переболевших, вакцинированных людей. Проба на белково-полисахаридный комплекс на основе гидролиза вегетативных форм сибиреязвенных бактерий выполняется внутрикожно введением антраксинома. Через 2-4 суток оценивают результат. Реакция положительная при гиперемии, инфильтрации тканей более 15 мм. Сложная диагностика позволяет с высокой достоверностью определить наличие/отсутствие в организме возбудителя сибирской язвы.

Эпидемиология заболевания

Сибирская язва – опасное инфекционное заболевание бактериальной природы с кратким инкубационным периодом, сильной интоксикацией организма и летальным исходом. Очаги и вспышки преимущественно регистрируют в сельскохозяйственных районах среди поголовья крупного рогатого и домашнего скота. В результате болезни животных заражаются люди. Бактерии попадают в почву, при благоприятных условиях десятилетиями сохраняют жизнеспособность в виде спор.

Без адекватного лечения восстановить здоровье человека невозможно

Первоначальным очагом воспаления выступает карбункул на коже, напоминающий язву. Внутри карбункула расположены омертвевшие ткани (некроз), вокруг очага наблюдается воспаление. Заболевание характеризуется поражением лимфатических узлов. Прогрессирование болезни наступает за счет проникновения возбудителя во все органы с кровью.

Основные пути передачи сибирской язвы:

Контактный. Заболевают люди, работающие с зараженными животными: скотники, пастухи, работники молокозаводов, мясокомбинатов, скотобоен. Признаки: глубокое поражение кожи с воспалительным процессом геморрагически-некротического характера, отек тканей, вовлечение лимфоузлов.
Пищевой (алиментарный). Возбудители попадают в желудочно-кишечный тракт с инфицированными продуктами – молоком, мясом, что говорит о повреждении слизистой оболочки ЖКТ болезнью. Первичный очаг (карбункул) отсутствует, бациллы заражают кровь, вызывают сепсис.
Воздушно-пылевой. В медицинской практике встречается у сотрудников производств по выделке кож, меха, шерсти зараженных животных. Опасна пыль у дорог, по которым перемещаются стада овец, коров. Характерно инфицирование дыхательных путей. Бактерии проникают в лимфоузлы, вызывают некроз, сепсис.
Трансмиссионный. Передача палочки происходит при укусах насекомых – слепней, мух. В их ротовых полостях бактерии сохраняют жизнеспособность до пяти дней. Реже встречается лабораторный путь заражения, когда сотрудники лабораторий получают Bacillus anthracis при несоблюдении правил работы с патогенным материалом.

В эпидемиологии сибирской язвы основой патогенеза служит выработка бактериями экзотоксина. Поскольку споры долгое время живут в почве, остается риск заражения животных, а от них – человека. Немногочисленные случаи заболевания людей регистрируют в России, Беларуси, Киргизии, Таджикистане, странах Азии и Африки.

Особенности заболевания

В патогенезе болезни инфекционными воротами для проникновения бактерий определяют пораженные кожные покровы. Реже бациллы попадают в организм через дыхательные пути и кишечно-желудочный тракт. Первичным признаком инфицирования является возникновение сибиреязвенного карбункула. Различают четыре основные степени протекания болезни.

Симптомы сибирской язвы в разных формах

У людей выделяют несколько форм протекания болезни, для которых характерны разные симптомы и признаки. Частота поражения кожной формой составляет 99% всех случаев. Пути проникновения – кожа, локализация – карбункул на лице, язвы на шее, руках, спине, других частях тела. Классифицируется на несколько разновидностей:

Карбункулезная начинается с образования на коже пятен синюшно-красного цвета, перерастающих в ярко-красные узлы, они зудят и чешутся. Выраженный отек мягких тканей, некроз (отмирание) в центральной части карбункула.
Эдематозная кожная сибиреязвенная инфекция сопровождается отеком тканей, на месте которого образуется карбункул. Тяжелая форма заболевания, регистрируется нечасто. Отечная область преобразуется в крупные антраксы.
Буллезная разновидность протекает с образованием инфильтрата в месте внедрения инфекции. Характерно наличие пузырей с геморрагической жидкостью, некроз тканей, происходят множественные язвенные поражения, очаги.
Для эризипелоидной разновидности на месте внедрения инфекции характерно образование пузырьков, заполненных серозным инфильтратом. После вскрытия в очагах поражения формируются язвы, покрытые уплотненной черной коркой.

Кожная сибиреязвенная болезнь может менее опасно протекать в легкой форме или с тяжелыми последствиями. 80% случаев – легкая форма заболевания, которая хорошо поддается лечению. Характерные симптомы: отсутствие серьезных нарушений состояния пациента, незначительное повышение температуры, умеренные признаки интоксикации.

Вакцинация играет не последнюю роль в профилактике

Если развивается кожная инфекция тяжелой формы, базовая температура поднимается до 40 градусов. У пациента наблюдается головная боль, слабость, отсутствие аппетита, другие признаки сильного отравления токсинами. Осложнение – сибиреязвенный сепсис со смертельным исходом.

Развитие кожного поражения длится около недели. При лечении струп отторгается, язвенные участки заживают, на месте заживления наблюдается уплотненная рубцовая ткань. Если к инфекции присоединяется сепсис, вылечить заболевание практически невозможно.

Кишечная сибирская язва имеет наиболее тяжелое течение. После получения дозы бацилл с продуктами питания, на 3-5-й день проявляются следующие признаки заболевания:

болит живот на фоне повышенной температуры;
пациента тошнит, рвота с желчью, кровью;
пропадает аппетит, происходит поражение ротоглотки;
кишечная непроходимость, кровянистый стул, парез;
увеличение, отек, воспаление лимфатических узлов;
присоединение симптомов, свойственных ангине.

Тяжелая кишечная форма болезни может вызвать отек шеи, нарушение глотательной функции, кровотечение изо рта, асфиксию и смерть в результате нарушения дыхательной функции.

Если инфицирование Bacillus anthracis сопровождается поражением легких, выраженные признаки болезни на первоначальном этапе отсутствуют. Пациента беспокоит боль в груди, появляется насморк, кашель, мышечная боль и слабость, характерные для множества инфекций дыхательных путей. На протяжении трех дней клиническая картина при легочной форме кардинально меняется, и появляются дополнительные симптомы:

сильный озноб, температура до 40 градусов и выше;
лихорадочное состояние, признаки интоксикации, одышка;
посинение кожи;
увеличение частоты дыхания;
отделение пенисто-кровавой жидкой слизи при кашле.

При легочном поражении организма сибиреязвенной бациллой не исключено увеличение лимфоузлов, сдавливание трахеи, удушье и смерть. Заболевание быстро прогрессирует, может спровоцировать отек легких, сердечную недостаточность.

Септическая форма (заражение крови) встречается нечасто, наступает при несвоевременном лечении любой из вышеперечисленных разновидностей болезни. Токсины палочки начинают циркулировать по кровеносной системе, поражая практически все внутренние органы и ткани. Результатом сепсиса становится выраженный инфекционно-токсический шок, несовместимый с жизнью. Симптомы септической формы заболевания:

озноб, поверхностное дыхание;
высокая температура;
болит живот, грудная клетка;
тошнота, рвота;
частое дыхание, сильный кашель с кровавой пеной;
жидкий стул с кровью;
признаки пневмонии.

При септической и генерализованной форме заболевания возможно проникновение бактерий в клетки головного мозга, проявление признаков менингита, спутанности сознания. Сепсис чрезвычайно опасен, поскольку перитонит, отек легких, поражение сердечной мышцы приводят к моментальной смерти.

Ученые проводят исследования улучшенной вакцины против бациллы Bacillus anthracis

Лечение

За основу лечения сибирской язвы взята высокая чувствительность бацилл к антибактериальным лекарственным препаратам пенициллиновой, тетрациклиновой фармакологической группы, макролидам, аминогликозидам, фторхинолонам. Целью лечебной терапии является снижение воспалительного, геморрагического, интоксикационного синдрома заболевания, поддержание пациента до полного выздоровления. Основы консервативного лечения:

После исследования и постановки диагноза пациента изолируют в стационар, прекращают контакты с родственниками, членами семьи.
Поддержка работы всех внутренних органов и систем, назначение щадящей диеты.
Назначение антибактериальных препаратов внутривенно и перорально – Пенициллин, Ципрофлоксацин, Эритромицин, Тетрациклин, Стрептомицин.
Инфузионная терапия предполагает назначение коллоидных и кристаллоидных растворов – введение раствора внутривенно, внутривенно капельно.
Введение внутримышечно противосибиреязвенного иммуноглобулина с выраженным антитоксическим эффектом.
Включение в терапевтическое лечение препаратов крови, раствора глюкозы, назначение гормонов при поражении головного мозга.

Исключается воздействие на карбункул хирургического вмешательства, поскольку это может привести к скоротечному распространению инфекции на другие органы. Основные препараты, используемые для лечения сибирской язвы, приведены в таблице.

Лекарственный препарат	Действие	Длительность приема, введение
Пенициллин	Бактерицидный эффект	Внутривенно, внутримышечно, 7-10 дней
Эритромицин	Бактериостатическое действие	7-10 суток
Тетрациклин	Остановка роста и развития бацилл	7-10 дней
Ципрофлоксацин	Обширный бактерицидный эффект	Внутривенно капельно 7-14 дней
Левофлоксацин	Уничтожение патогенных микроорганизмов	7-14 суток внутривенно капельно
Доксициклин	Широкий спектр действия	Корректировка дозировки, внутривенно капельно
Полиглюкин	Противошоковый эффект	Внутривенно
Реополиглюкин	Улучшение кровообращения	Внутривенно капельно
Хлорид натрия 0,9%	Восполнение натрия, хлора при плазмопотере	До 2 л в сутки
Глюкоза 5%	Дезинтоксикация, восполнение уровня жидкости	До 3 л в сутки
Раствор Рингера	Восполнение плазмопотери и межклеточной жидкости	1-3 л в сутки
Иммуноглобулин	Создание иммунитета к возбудителю, антитоксический эффект	Внутримышечно, корректировка дозировки по тяжести заболевания
Альбумин	Белковое питание организма	До 1 литра в сутки
Свежезамороженная плазма	Поддержание жидкого состава крови	Индивидуально, до 2 литров в сутки
Глюкокортикостероиды	Снижение шокового состояния	Индивидуально, показание – тяжелое течение болезни

Препараты при лечении опасной болезни

Основная цель терапии – сократить действие токсина сибиреязвенной палочки и подавить рост и развитие возбудителя. Поэтому в каждом случае перечень лекарственных препаратов будет индивидуальным, как дозировка и продолжительность лечения.

Осложнения

Bacillus anthracis представляет высокую опасность для здоровья людей, поскольку заболевание может вызвать серьезные осложнения. Помимо некроза тканей внутри первичной пораженной области на коже, при несвоевременном лечении или развитии септических и воспалительных процессов, могут наступить последствия, опасные для состояния пациента или несовместимые с жизнью. К ним относятся:

Инфекционно-токсический шок – отравление организма.
Менингит – воспаление оболочек головного, спинного мозга.
Пневмония и отек легких с признаками учащенного дыхания.
Менингоэнцефалит – воспаление в оболочке головного мозга.
Перитонит – воспалительные процессы в брюшной полости.
Асфиксия – удушье в результате кислородного голодания.

Сепсис приводит к заражению внутренних органов и систем в результате проникновения сибиреязвенных бактерий в кровь. Заболевание может вызвать поражение центральной нервной системы, нарушение сердечнососудистой функции.

Вакцина может быть активной и комбинированной

Иммунитет у переболевших

У животных и людей, которые переболели инфекцией и выздоровели, наблюдается стойкий иммунитет против заболевания. Бактерии, которые вызывают сибирскую язву, в живом организме образуют защитную капсулу. У переболевших пациентов вырабатываются антитела, способные разрушать капсулы палочек. Зарегистрированы единичные случаи повторного заражения переболевших людей. Формирование иммунитета происходит за счет выработки протективного антигена и фагоцитарной реакции. Защитный ответ иммунной системы организма не сохраняется на всю жизнь, поэтому исключать повторное заражение нельзя. В частности, высок риск для пациентов, связанных с животноводческой деятельностью, которые после болезни вернулись на прежнее место работы.

Прогноз и профилактика

Прогноз при поражении человека сибиреязвенной палочкой положительный, но даже при своевременно начатом лечении не гарантировано полное выздоровление. Результативность терапии зависит от формы и тяжести заболевания. При поражении кожи летальный исход возможен в 2% случаев, отсутствие лечения приводит к летальности 20%. Легочная и кишечная форма характеризуются высокой смертностью пациентов (более 90%) даже при своевременном и грамотном лечении, в чем и заключается особая опасность заболевания. Септическая форма – неблагоприятный прогноз для больных.

Профилактика сибирской язвы включает в себя проведение ряда мероприятий:

Вакцинация населения по группам риска.
Строгое соблюдение ветеринарного контроля.
Выявление эпидемиологической ситуации.
Своевременная госпитализация и лечение пациентов.
Реализация дезинфекционных мероприятий в палатах.
Вакцинация животных, изоляция зараженных особей.
Сжигание трупов животных без вскрытия.
Погребение пациентов с летальным исходом без вскрытия.

Профилактические мероприятия направлены на изоляцию больных особей животных, исключение контакта с ними людей. Работников, которые могли получить заражение, проверяют две недели. Обязательно проводят обеззараживание помещений и территорий, где находятся сельскохозяйственные животные. Среди населения организуют разъяснительную работу сотрудники санитарно-эпидемиологических служб.

Вакцинация

Специфической мерой профилактики против возбудителя сибиреязвенной болезни является вакцинация людей. Для этого используют живую или комбинированную вакцину. Живая включает небольшое количество сибиреязвенных спор с низкой вирулентностью. Инфекционный процесс бактериального заражения протекает бессимптомно, после чего у человека вырабатывается стойкий иммунитет против палочки сибирской язвы. Вакцина вводится двукратно.

Комбинированная вакцина содержит живые и инактивированные бактерии (не способные размножаться), вводится однократно. Людям, контактировавшим с больными, вводят противосибиреязвенный иммуноглобулин и антибиотики.

После вакцинации возможны побочные эффекты в виде повышения температуры, головной боли, увеличения лимфоузлов. Противопоказаниями для прививки является онкология, ВИЧ. Не вводят вакцину детям до 14 лет, беременным женщинам.

Бацилла, вызывающая смертельное заболевание

При ослабленном естественном иммунитете бактерии в организме стремительно развиваются, распространяя опасный токсин. Окружающие люди находятся в группе риска в результате высокой вирулентности бацилл. При кожном поражении прогноз благоприятный, но требуется немедленная госпитализация больного, проведение диагностики и назначение эффективной терапии.

Страница 58 из 91

Палочка сибирской язвы - Вас. anthracis (рис. 96) принадлежит к группе грамположительных аэробных спорообразующих бацилл, широко распространенных в природе. Сибиреязвенная палочка является единственным патогенным представителем этой группы.
Бациллы сибирской язвы были впервые обнаружены: в крови животных немецким ученым А. Паллендером в 1839 г. Эти же микроорганизмы наблюдал в крови животных во Франции в 1850 г. К. Давен. Однако истинное значение этих микробов в этиологии сибирской язеы установил в России проф. Ф. А. Брауэль в 1855 г. Р. Кох своими классическими исследованиями по сибирской язве окончательно доказал бактерийную природу палочек Паллендера и Давена, установил их способность к спорообразованию, получил чистую культуру и успешно заразил ею опытных животных.
Морфология и тинкториальные свойства. Бациллы сибирской язвы - крупные толстые палочки, имеющие 1-2 мк в ширину и 8 мк в длину. Располагаются преимущественно парами или цепочками. Неподвижны, концы палочек на окрашенных препаратах представляются как бы обрубленными.

Рис. 96. Палочка сибирской язвы.
1 - колонии на агаре; 2 - сибиреязвенные бациллы в чистой культуре; 3 - рост при посеве уколом в желатину.
Морфологической особенностью сибиреязвенных бацилл является их способность образовывать споры и капсулы (рис. 97 и 98 на вклейке).

Рис. 97. Споры палочки сибирской язвы. Окраска по Ганзену.

Споры располагаются центрально, овальной формы; диаметр их не превышает поперечника микробной клетки. Споры образуются вне организма при достаточном притоке кислорода, капсулы же, напротив, образуются в организме и при культивировании бацилл на питательных средах утрачиваются. Бациллы сибирской язвы хорошо красятся анилиновыми красками, грамположительны.
Культуральные и биохимические свойства. Палочка сибирской язвы хорошо растет на всех питательных средах, аэроб. Температурный оптимум 37°
На чашках с агаром вырастают довольно крупные шероховатые колонии, матовые с бахромчатой периферией. Это вирулентные R-колонии.
При малом увеличении микроскопа колонии имеют волокнистое строение, причем волокна собраны в виде завитков волос, поэтому их и сравнивают с львиной гривой или головой медузы.
Реже встречаются гладкие, с ровными краями колонии (S-колонии), содержащие слабо вирулентные или авирулентные формы бацилл.
На скошенном агаре через 24 часа роста образуется серовато-белый налет с завитками по краям. Рост на бульоне характерен: среда остается прозрачной, а на дне отмечается осадок, напоминающий комок ваты. Желатина медленно разжижается рост напоминает елочку, опрокинутую вниз вершиной. Молоко створаживается на 3-4-й день роста, затем казеин пептонизируется. На картофеле получается сухой серовато-белый налет. Микроб сахаролитичен: разлагает с образованием кислоты (без газа) глюкозу, мальтозу, лактозу, гемолитическими свойствами не обладает.
Антигенная структура. Сибиреязвенная палочка обладает специфическими антигенами: полисахаридным соматическим и белковым, находящимся в капсуле. Полисахаридный антиген термостабильный, долго сохраняется в трупах и шкурах животных. Извлеченный из них при помощи кипячения он дает положительную реакцию преципитации с типоспецифической сывороткой.
Резистентность. Вегетативные формы сибиреязвенных бацилл малоустойчивы, споры же отличаются большой резистентностью. Они выдерживают кипячение до 5-10 минут, прямой солнечный свет в течение 100 часов. В высушенном состоянии споры могут сохраняться жизнеспособными до 20 лет. К дезинфицирующим веществам очень устойчивы. В 15% хлорной воде остаются жизнеспособными в течение 6 часов, в 4% соляной кислоте-15 дней, в 5% растворе сулемы-15 дней. Для обеззараживания при сибирской язве применяют: сухую хлорную известь, хлорно-известковое молоко, осветленные растворы этого молока, активированные растворы хлорамина, горячие растворы едкого натра.
Токсинообразование и патогенность для животных.
Вопрос о токсинах палочек сибирской язвы до настоящего времени неясен. Попытки получить токсин in. vitro не увенчались успехом: ни экзо-, ни эндотоксина обнаружить не удалось. Введение чувствительным животным фильтратов бульонных культур или убитых микробных тел токсического действия почти не оказывает.
К сибирской язве особенно восприимчив крупный и мелкий рогатый скот, несколько меньше - лошади. Свиньи болеют ею гораздо реже. Невосприимчивы к сибирской язве кошки и собаки. Из лабораторных животных наиболее чувствительны к сибирской язве белые мыши и морские свинки. Подкожное введение небольшого количества вирулентных бацилл вызывает гибель животного в течение 2-4 дней.
Патогенез и клиника. Источником инфекции являются больные животные (крупный и мелкий рогатый скот, лошади) и получаемые от них продукты и сырье. У людей это заболевание встречается редко и связано чаще всего с определенной профессией. Заражение наступает в результате непосредственного контакта с больными животными (пастухи, рабочие боен и др.) или при соприкосновении с зараженными продуктами животного происхождения (кожевники, меховщики, шерстобиты). Легочная форма встречается у рабочих, занятых обработкой загрязненного тряпья («болезнь тряпичников»). Заражение происходит через кожу, слизистую оболочку верхних дыхательных путей и кишечник, в зависимости от места входных ворот сибирская язва у человека проявляется в трех формах: кожной, легочной и кишечной. Наиболее часто встречается кожная форма, реже легочная и весьма редко кишечная.

Рис. 98. Капсулы у палочки сибирской язвы. Окраска фуксином.

Инкубационный период длится 1-3 дня.
Кожная форма выражается в виде так называемой злокачественной пустулы (сибиреязвенный карбункул- Pustula maligna). Сначала появляется красное пятнышко, которое быстро переходит в папулу (узелок), а затем в пузырек, наполненный кровянистой жидкостью. Центр пузырька некротизируется, становится черным, что характерно для сибиреязвенного карбункула. Черный цвет сибиреязвенного карбункула послужил поводом назвать его углевиком (anthrax - уголь).
Некротический центральный участок карбункула часто окружается как бы ожерельем, состоящим из мелких пузырьков. Ткань в окружности карбункула отекает, ближайшие лимфатические узлы увеличиваются.
Заболевание сопровождается подъемом температуры до 40°, тяжелыми общими явлениями, слабостью сердечной деятельности, помрачением сознания, сама же язва
Из патологического материала делают мазки и окрашивают их по Граму. Обнаружение в мазках характерных крупных грамположительных палочек, окруженных капсулами, с наклонностью микробов располагаться цепочками дает возможность поставить предварительный диагноз. Однако для того чтобы поставить вполне точный диагноз, одного бактериоскопического исследования недостаточно. Поэтому необходимо выделить еще чистую культуру Вас. anthracis. Для этой цели исследуемый материал засевают на чашки с обычным агаром и в пробирки с бульоном. Через 20-24 часа выращивания изучают типичные колонии, которые при слабом увеличении микроскопа представляются в виде переплетающихся нитей. Из колоний делают высев на скошенный агар и затем исследуют выделенную чистую культуру.
Полученные данные бактериологического исследования подтверждаются заражением животных. Выделенную культуру вводят подкожно белой мыши или морской свинке, и если культура состоит из сибиреязвенных палочек, то животное погибает через 24-48 часов при картине острого сепсиса.
При подозрении на сепсис производят посевы крови. Если в исследуемом материале (кожа, шерсть и т. д.) бациллы или их споры не могут быть обнаружены бактериоскопическим и бактериологическим путем, прибегают к серологическому исследованию при помощи реакции термопреципитации по Асколи. Для постановки реакции необходимы следующие ингредиенты.

преципитирующая сибиреязвенная сыворотка;
нормальная сыворотка животного, от которого получена преципитирующая сыворотка;
сибиреязвенный стандартный антиген для контроля (готовят в институтах вакцин и сывороток);
антиген из материала, подлежащего исследованию.

Чаще всего для термопреципитации берут кусочки органов, шерсть, кожу и т. д. Указанный материал заливают 5-10-кратным объемом физиологического раствора и кипятят в водяной бане (при слабом огне) в течение 10-20 минут, а затем фильтруют через бумажный фильтр до полной прозрачности.
Положительный результат реакции заключается в немедленном (иногда через 5-10 минут) появлении кольцевидного преципитата па границе соприкосновения жидкостей. Появление кольца позже 10 минут учитывается как неспецифическая или сомнительная реакция.
Профилактика и терапия. Специфическая профилактика сибирской язвы широко применяется со времен Л. Пастера путем вакцинации животных аспорогенными культурами сибиреязвенной палочки. Применяют две вакцины, которые получают путем выращивания палочки при температуре 42-43° в течение 24 (первая вакцина) и 12 (вторая вакцина) дней.
В Советском Союзе до недавнего времени применялась вакцина Ценковского, которая готовится по принципу Пастера, но является более безопасной.
В последние годы широко используется новая бескапсульная вакцина СТИ (Санитарно-технического института), отличающаяся высокой эффективностью и безопасностью.
С лечебной целью больным вводят внутривенно или внутримышечно, иммунную противосибиреязвенную сыворотку в количестве 50-100 мл.
Помимо сыворотки, при сибирской язве применяют также новарсенол по 0,45-0,6 г внутривенно. По своему лечебному действию этот препарат уступает сыворотке. Положительный результат дает пенициллин при введении его по 300 000-400 000 ЕД в сутки до получения стойкого эффекта.

Страница 58 из 91

Рис. 96. Палочка сибирской язвы.
1 - колонии на агаре- 2 - сибиреязвенные бациллы в чистой культуре- 3 - рост при посеве уколом в желатину.
Морфологической особенностью сибиреязвенных бацилл является их способность образовывать споры и капсулы (рис. 97 и 98 на вклейке).

Рис. 97. Споры палочки сибирской язвы. Окраска по Ганзену.

Споры располагаются центрально, овальной формы- диаметр их не превышает поперечника микробной клетки. Споры образуются вне организма при достаточном притоке кислорода, капсулы же, напротив, образуются в организме и при культивировании бацилл на питательных средах утрачиваются. Бациллы сибирской язвы хорошо красятся анилиновыми красками, грамположительны.
Культуральные и биохимические свойства. Палочка сибирской язвы хорошо растет на всех питательных средах, аэроб. Температурный оптимум 37°
На чашках с агаром вырастают довольно крупные шероховатые колонии, матовые с бахромчатой периферией. Это вирулентные R-колонии.
При малом увеличении микроскопа колонии имеют волокнистое строение, причем волокна собраны в виде завитков волос, поэтому их и сравнивают с львиной гривой или головой медузы.
Реже встречаются гладкие, с ровными краями колонии (S-колонии), содержащие слабо вирулентные или авирулентные формы бацилл.
На скошенном агаре через 24 часа роста образуется серовато-белый налет с завитками по краям. Рост на бульоне характерен: среда остается прозрачной, а на дне отмечается осадок, напоминающий комок ваты. Желатина медленно разжижается рост напоминает елочку, опрокинутую вниз вершиной. Молоко створаживается на 3-4-й день роста, затем казеин пептонизируется. На картофеле получается сухой серовато-белый налет. Микроб сахаролитичен: разлагает с образованием кислоты (без газа) глюкозу, мальтозу, лактозу, гемолитическими свойствами не обладает.
Антигенная структура. Сибиреязвенная палочка обладает специфическими антигенами: полисахаридным соматическим и белковым, находящимся в капсуле. Полисахаридный антиген термостабильный, долго сохраняется в трупах и шкурах животных. Извлеченный из них при помощи кипячения он дает положительную реакцию преципитации с типоспецифической сывороткой.
Резистентность. Вегетативные формы сибиреязвенных бацилл малоустойчивы, споры же отличаются большой резистентностью. Они выдерживают кипячение до 5-10 минут, прямой солнечный свет в течение 100 часов. В высушенном состоянии споры могут сохраняться жизнеспособными до 20 лет. К дезинфицирующим веществам очень устойчивы. В 15% хлорной воде остаются жизнеспособными в течение 6 часов, в 4% соляной кислоте-15 дней, в 5% растворе сулемы-15 дней. Для обеззараживания при сибирской язве применяют: сухую хлорную известь, хлорно-известковое молоко, осветленные растворы этого молока, активированные растворы хлорамина, горячие растворы едкого натра.
Токсинообразование и патогенность для животных.
Вопрос о токсинах палочек сибирской язвы до настоящего времени неясен. Попытки получить токсин in. vitro не увенчались успехом: ни экзо-, ни эндотоксина обнаружить не удалось. Введение чувствительным животным фильтратов бульонных культур или убитых микробных тел токсического действия почти не оказывает.
К сибирской язве особенно восприимчив крупный и мелкий рогатый скот, несколько меньше - лошади. Свиньи болеют ею гораздо реже. Невосприимчивы к сибирской язве кошки и собаки. Из лабораторных животных наиболее чувствительны к сибирской язве белые мыши и морские свинки. Подкожное введение небольшого количества вирулентных бацилл вызывает гибель животного в течение 2-4 дней.
Патогенез и клиника. Источником инфекции являются больные животные (крупный и мелкий рогатый скот, лошади) и получаемые от них продукты и сырье. У людей это заболевание встречается редко и связано чаще всего с определенной профессией. Заражение наступает в результате непосредственного контакта с больными животными (пастухи, рабочие боен и др.) или при соприкосновении с зараженными продуктами животного происхождения (кожевники, меховщики, шерстобиты). Легочная форма встречается у рабочих, занятых обработкой загрязненного тряпья («болезнь тряпичников»). Заражение происходит через кожу, слизистую оболочку верхних дыхательных путей и кишечник, в зависимости от места входных ворот сибирская язва у человека проявляется в трех формах: кожной, легочной и кишечной. Наиболее часто встречается кожная форма, реже легочная и весьма редко кишечная.

Рис. 98. Капсулы у палочки сибирской язвы. Окраска фуксином.

преципитирующая сибиреязвенная сыворотка;
нормальная сыворотка животного, от которого получена преципитирующая сыворотка;
сибиреязвенный стандартный антиген для контроля (готовят в институтах вакцин и сывороток);
антиген из материала, подлежащего исследованию.